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茶多酚(TP)检测试剂盒(酒石酸铁比色法)

简要描述:

茶多酚(TP)检测试剂盒(酒石酸铁比色法)
茶多酚(Tea Polyphenols,TP)是茶叶中多酚类物质的总称,包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等,是一类儿茶素为主体的黄酮化合物,儿茶素占60~80%,具有C6-C3-C6碳骨架结构,是一种重要的天然抗氧化物质,能够清除自由基。类物质茶多酚又称茶鞣或茶单宁。

更新时间:2021-11-24型号:BA1569-50厂商性质:生产厂家浏览量:42

茶多酚(TP)检测试剂盒(酒石酸铁比色法)

产品货号: BA1569

 

产品规格: 50T

 

产品简介:

茶多酚(Tea PolyphenolsTP)是茶叶中多酚类物质的总称,包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等,是一类儿茶素为主体的黄酮化合物,儿茶素占60~80%,具有C6-C3-C6碳骨架结构,是一种重要的天然抗氧化物质,能够清除自由基。类物质茶多酚又称茶鞣或茶单宁。

茶多酚(TP)检测试剂盒(酒石酸铁比色法)检测原理是以酒石酸铁为底物,利用茶多酚与酒石酸铁反应,生成稳定化合物,以分光光度计540nm处测定吸光度,在一定范围内吸光度与颜色深浅的变化成正比,与标准曲线比较,进而计算茶多酚含量。该试剂盒主要用于测定植物组织、血清等样品中茶多酚含量,尤其适用于测定茶叶中茶多酚含量。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

 

产品组成:

产品名称

50T

保存条件

试剂(A): 茶多酚标准(1mg/ml

1ml

4℃,避光

试剂(B): TP Assay bufffer

500ml

4

试剂(C):TP显色液

25ml

4℃,避光

 

自备材料:

1.        蒸馏水

2.        研钵

3.        离心管或试管

4.        离心机

5.        比色杯

6.        分光光度计

 

操作步骤(仅供参考):

1.        配制茶多酚标准:取干净离心管或试管和茶多酚标准(1mg/ml),按下表进行操作,依次稀释。

加入物(ml

1

2

 3

4

5

茶多酚标准(1mg/ml

0.01

0.02

0.03

0.04

0.05

TP Assay buffer

0.49

0.48

0.47

0.46

0.45

相对于茶多酚含量(μg/ml

20

40

60

80

100

2.        准备样品: 

①植物样品:取植物组织,研磨成粉末。煮沸 TPAssaybuffer,将0.2g粉末完全加入TPAssaybuffer中,沸水浴,用200目细胞筛或滤纸过滤。滤渣再继续置于新的煮沸4.5mlTPAssaybuffer中,沸水浴,用200目细胞筛或滤纸过滤,合并两次滤液。5000g离心,取上清液,即为茶多酚提取液。4℃避光保存,用于茶多酚的检测。 

②血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定,4℃避光保存,用于茶多酚的检测。 

③细胞或组织样品:取恰当细胞或组织裂解液,如有必要用TPAssaybuffer进行适当匀浆,5000g离心15min,取上清液,即为茶多酚提取液。4℃避光保存,用于茶多酚的检测。

④高浓度样品:如果样品中含有较浓度的茶多酚,可以使用TPAssaybuffer进行恰当的稀释。 

3.        TP加样:按照下表设置空白管、对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡。如果样品中的TP浓度过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测最好能设置2平行管,求平均值。

加入物(ml

空白管

标准管

测定管

TP Assay buffer

2

1.5

1.5

茶多酚标准(1-5号)

-

0.5

-

待测样品

-

-

0.5

TP显色液

0.5

0.5

0.5

4.        TP测定:比色杯光径1.0cm,以空白调零,以分光光度计测定540nm处标准管、测定管的吸光度。

 

计算:

以系列茶多酚标准浓度(1-5)(20406080100μg/ml)为横坐标,以对应的吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,求得回归方程。以测定管吸光度代入回归方程求得提取液中TP含量。

组织样本TP含量(μg/g)=(C×VT)/(W×VS)

液体样本TP含量(μg/ml)=(C×VT)/VS

VS=测定时所用提取液的体积(ml)

 

注意事项:

1.        提取茶多酚时,注意提前煮沸TPAssaybuffer,以便充分提取。 

2.        如果没有分光光度计,也可以使用普通的酶标仪测定。 

3.        每次检测指标不宜过多,否则操作时间不一,有可能导致样本间的差异。

 

有效期:6个月有效。

 


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