尿素氮（BUN）含量检测试剂盒（微量法）

尿素氮（BUN）含量检测试剂盒（微量法）

注意：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

产品货号：BA1243

产品规格：100管/48样

产品简介：

尿素（BUN）是人体蛋白质代谢的主要终末产物，BUN构成了血液中绝大部分的非蛋白质氮，血液尿素氮是肾功能的主要指标之一。用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH3-N，生成的蓝色靛酚和尿素氮的浓度成正比。

产品内容：

试剂一：粉剂×2瓶，4℃避光保存，临用前加2mL蒸馏水充分溶解。

试剂二：液体15mL×1瓶，4℃保存。

试剂三A液：液体20mL×1支，4℃保存；

试剂三B液：液体20mL×1瓶，4℃保存；

将AB溶液保存在冰箱中。使用前将2溶液各20毫升混合，用蒸馏水稀释至100毫升。

试剂四：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。

标准品：粉剂×1瓶，4℃保存。10mg尿素。临用前加入4.66mL蒸馏水配制成1mg/mL尿素氮标准液。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、天平、研钵/匀浆器、低温离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、恒温水浴锅。

操作步骤：

一、样品处理

1、组织：按照质量（g）：蒸馏水体积(mL)为1：5-10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL蒸馏水），冰上匀浆后于4℃，13000g离心15min，取上清待测。

2、细胞：按照细胞数量（10⁴个）：蒸馏水体积（mL）为500-1000：1的比例（建议500万个细胞加入1mL蒸馏水），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3s，间隔7s，总时间3min）；然后4℃，13000g离心15min，取上清置于冰上待测。

3、血清（浆）或其它液体：直接检测。

二、测定操作：

1、分光光度计/酶标仪预热30min，波长调至630nm，分光光度计蒸馏水调零。

2、将1mg/mL尿素氮标准液用蒸馏水稀释至50μg/mL备用。

3、加样表：

三、计算公式：

1、按样本质量计算：

尿素氮含量（μg/g）= ΔA测定÷ΔA标准×C标准品×V提取÷W

=25×ΔA测定÷ΔA标准÷W。

2.按蛋白浓度计算：

尿素氮含量（μg/mg prot）=ΔA测定÷ΔA标准×C标准品×V提取÷（Cpr×V提取）

=25×ΔA测定÷ΔA标准÷Cpr。

3、按细胞数计算：

尿素氮含量（μg/10⁴ cell）= ΔA测定÷ΔA标准×C标准品×V提取÷细胞数量

=25×ΔA测定÷ΔA标准÷细胞数量。

4、按液体体积计算：

尿素氮含量（μg/mL）=ΔA测定÷ΔA标准×C标准品

=25×ΔA测定÷ΔA标准。

C标准品：标准品浓度，25μg/mL；V提取：提取液体积，1mL；W：样品质量，g；Cpr：样品蛋白浓度，mg/mL；细胞数量：以万计。

注意事项：

1、配制好的试剂一在2-8℃条件下可保存一周。

2、ΔA测定大于1或者A测定管大于1时，建议将样品用蒸馏水稀释后在进行测定。