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葡萄糖含量检测试剂盒(可见分光光度法)

简要描述:

葡萄糖含量检测试剂盒(可见分光光度法)
葡萄糖不仅是细胞能量代谢的主要底物,而且其代谢中间产物是生物合成的重要底物。植物可通过光合作用产生葡萄糖。就哺乳动物而言,葡萄糖不仅是大脑神经系统、肌肉、脂肪组织等的一能源,而且与还原性辅酶、乳糖和乳脂的合成密切相关。

更新时间:2021-11-22型号:BA1246-50厂商性质:生产厂家浏览量:65

葡萄糖含量检测试剂盒(可见分光光度法)

注意:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

 

产品货号:BA1246

 

产品规格:50/48

                                        

产品简介:

葡萄糖不仅是细胞能量代谢的主要底物,而且其代谢中间产物是生物合成的重要底物。植物可通过光合作用产生葡萄糖。就哺乳动物而言,葡萄糖不仅是大脑神经系统、肌肉、脂肪组织等的一能源,而且与还原性辅酶、乳糖和乳脂的合成密切相关。

葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢;过氧化物酶催化过氧化氢氧化4-氨基安替比林偶联酚,生成有色化合物,在505nm有特征吸收峰。

 

产品内容:

试剂一:0.5μmol/mL葡萄糖溶液10mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:液体25mL×1瓶,4℃保存;

试剂三:液体25mL×1瓶,4℃保存;

 

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。

 

操作步骤:

一、葡萄糖提取:

1、组织的处理:称取约0.1g样本,加入1mL蒸馏水研磨成匀浆,置沸水浴中煮沸10分钟(盖紧,防止水分散失),冷却后,8000g,常温离心10min,取上清液备用。

2、细菌或细胞处理:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):蒸馏水体积(mL)为500~10001的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL蒸馏水),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3S,间隔10S,重复30次),置沸水浴中煮沸10分钟(盖紧,防止水分散失),冷却后,8000g25℃离心10min,取上清液备用。

二、测定步骤:

1 分光光度计预热30min以上,调节波长至505nm,蒸馏水调零。

2 1.5mL离心管中依次加入下列试剂:

试剂名称(μL

空白管

标准管

测定管

样本



100

试剂一


100


蒸馏水

100



混合试剂

900

900

900

混匀,置37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴中,保温15min,于505nm波长处读取吸光度。

三、葡萄糖含量计算:

1、按蛋白浓度计算

葡萄糖含量(µmol/mg prot)=C ×(A测定管-A空白管A标准管-A空白管)×V÷Cpr×V样)

0.5×(A测定管-A空白管A标准管-A空白管)÷Cpr

2、按样本鲜重计算

葡萄糖含量(µmol/g 鲜重)=C ×(A测定管-A空白管A标准管-A空白管) ×V÷W÷V样总×V样)

0.5 ×(A测定管-A空白管A标准管-A空白管) ÷W

3、按细菌或细胞数量计算

葡萄糖含量(µmol/104 cell)=C ×(A测定管-A空白管A标准管-A空白管) ×V÷500÷V样总×V样)

0.001 ×(A测定管-A空白管A标准管-A空白管)

C:葡萄糖溶液浓度,0.5µmol/mLCpr:样本蛋白浓度,mg/mLV样:加入的样本体积,100µL=0.1mLV样总:样本总体积,1mLW:样本鲜重,g500:细菌或细胞数量,500万。

4、若A测定管大于1.5,稀释后进行实验。

 

 

 


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