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维生素C检测试剂盒(菲咯啉比色法)

简要描述:

维生素C检测试剂盒(菲咯啉比色法)
维生素C(Vitamin C)又称L-抗坏血酸,是高等灵长类动物与其他少数生物的必需营养素。在生物体内,维生素C是一种抗氧化剂,为酸性己糖衍生物,是稀醇式己糖酸内酯,保护身体免于自由基的威胁,同时也是一种辅酶,其广泛的食物来源为各类新鲜蔬果。Vc有L-型和D-型两种异构体,只有L-型的才具有生理功能,还原型和氧化型都有生理活性。

更新时间:2021-11-19型号:BA1722-50厂商性质:生产厂家浏览量:14

维生素C检测试剂盒(菲咯啉比色法)

产品货号:BA1722

产品规格:50T

产品简介:

维生素C(Vitamin C)又称L-抗坏血酸,是高等灵长类动物与其他少数生物的必需营养素。在生物体内,维生素C是一种抗氧化剂,为酸性己糖衍生物,是稀醇式己糖酸内酯,保护身体免于自由基的威胁,同时也是一种辅酶,其广泛的食物来源为各类新鲜蔬果。VcL-型和D-型两种异构体,只有L-型的才具有生理功能,还原型和氧化型都有生理活性。

尚宝生物 维生素C检测试剂盒(菲咯啉比色法)检测原理是在酸性条件下,维生素C把三价铁离子还原成亚铁离子,后者与菲咯啉形成稳定的红色螯合物,以分光光度计534nm处检测吸光度,在一定浓度范围(样品浓度控制在10~250μ g/ml)吸光度与维生素C含量呈线性关系,获得Vitamin C含量。该试剂盒主要用于植物组织中的维生素C(抗坏血酸)的检测,其优点是:1、反应稳定,不易褪色;2、操作简便;3、还原糖及其他常见的还原物质对实验没有干扰,因此专一性好;4、灵敏度高。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

产品组成:

产品名称

50T

储存条件

试剂(A): Vitamin C标准(250μg/ml)

5ml

4℃,避光

试剂(B): 组织匀浆液(5×)

500ml

室温,避光

试剂(C): 酸性缓冲液

30ml

室温

试剂(D): Vitamin C Assay buffer

30ml

室温,避光

试剂(E): 菲咯啉显色液

60ml

4℃,避光

自备材料:

1.        蒸馏水

2.        无水乙醇

3.        研钵或匀浆器

4.        离心管或试管

5.        离心机

6.        比色杯

7.        分光光度计

操作步骤:

1.        稀释组织匀浆液:按组织匀浆液(5×):蒸馏水=41的比例稀释,获得1×组织匀浆液,待用。

2.        准备样品:取待测材料如青菜、水果、松针等,清洗擦干,准确称量5g,加入研磨器内。加入少量1×组织匀浆液,研磨碎,留取上清,再次用1×组织匀浆液研磨,最后一并倒入50ml离心管,补充1×组织匀浆液至45ml。充分混匀后,4000g离心5min,上清液即为待测液。

3.        配制系列Vitamin C标准:取干净离心管或试管,按下表进行操作,依次稀释。

加入物(ml

1

2

3

4

5

6

Vitamin C标准(250μg/ml)

0.04

0.08

0.16

0.24

0.32

0.4

蒸馏水

0.96

0.92

0.84

0.76

0.68

0.6

相当于Vitamin C含量(μg)

10

20

40

60

80

100

4.        Vitamin C加样:按照下表设置空白管、标准管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡。如果样品中的 Vitamin C 含量过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测最好能设置2平行管,求平均值。

加入物

空白管

标准管

测定管

1×组织匀浆液

1.0

-

-

系列Vitamin C标准(1-6)

-

1.0

-

待测液

-

-

1.0

无水乙醇

0.5

0.5

0.5

酸性缓冲液

0.25

0.25

0.25

Vitamin C Assay buffer

0.25

0.25

0.25

菲咯啉显色液

0.5

0.5

0.5

5.        Vitamin C测定:立即混匀,以空白调零,比色光径1cm,以分光光度计测定534nm处系列标准管、测定管的吸光度。

计算:

以系列标准Vitamin C (1020406080100μg)为横坐标,以对应的吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,求得回归方程。以测定管吸光度代入回归方程求得维生素C含量。

维生素C含量(mg/100g)=(m0×V T×100)/(m1×VS×1000)

式中:m0 =根据待测样品的吸光度在标准曲线求得的维生素C的质量(μg)

VT =待测液的总体积(ml)

m1 =样品质量(g)

VS =测定时取样体积(ml)

100=100g

注意事项:

1.        上述低温试剂避免反复冻融,以免失效或效率下降。

2.        组织匀浆液(5×)久置或低温保存,容易产生乳白色浑浊。如果白色浑浊不明显,可以直接使用,不影响效果;如果白色浑浊较多,应弃用。

3.        待测样本如不能及时测定,应置于2~8℃保存,3天内稳定。

4.        如果样品浓度过高,应用蒸馏水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。

保存条件:6个月有效。


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