产品中心您现在的位置:首页 > 产品展示 > 试剂盒 > 生化试剂盒 > BA1467-50总抗氧化能力(T-AOC)检测试剂盒

总抗氧化能力(T-AOC)检测试剂盒

简要描述:

总抗氧化能力(T-AOC)检测试剂盒(可见分光光度法)
测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液,细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。

在酸性环境下,还原Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)产生蓝色的Fe2+-TPTZ 的能力反映了总抗氧化能力。

更新时间:2021-11-18型号:BA1467-50厂商性质:生产厂家浏览量:21

总抗氧化能力(T-AOC)检测试剂盒(可见分光光度法)

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

产品货号:BA1467

 

产品规格:50/48

 

产品内容:

提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存,使用前预冷。

试剂一:液体35mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体20mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂三:液体5mL×1瓶,4℃避光保存。

标准品:粉剂×1支,10mgFeSO4·7H2O4℃保存。临用前加入1.75ml蒸馏水,滴加1滴浓硫酸,制备20µmol/mL FeSO4标准溶液。

混合液(现配现用):将试剂一、试剂二、试剂三按7:1:1的比例混合,使用前预温至37℃

 

产品说明:

测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液,细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。

在酸性环境下,还原Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)产生蓝色的Fe2+-TPTZ 的能力反映了总抗氧化能力。

 

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、恒温水浴锅、低温离心机、1mL 玻璃比色皿和蒸馏水。

 

操作步骤:

一、样品的制备:

(1) 血清、血浆、唾液或尿液样品

血浆(制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝,不宜使用EDTA抗凝)5000r/min离心10min,取上清待测。血清、唾液或尿液样品直接用于测定,也可以-80℃冻存(不宜超过30 d)后再测定。

(2) 细胞或组织样品收集约100-200万个细胞或者约0.1g组织,加入1.0mL预冷的提取液,匀浆或超声以充分破碎

细胞并释放其中的抗氧化物,4℃10000r/min 离心5分钟,取上清待测。需测定蛋白浓度。

二测定步骤

1、标准曲线绘制:

20μmol/mL FeSO4标准溶液稀释至 0.20.10.050.0250.01250.006250.0031250.00156μmol/mL,分别取500μL标准溶液(蒸馏水作空白)加入500μL试剂二,充分混匀,反应10min,双蒸水调零,1cm光径,测定A593,计算ΔA=A标准-A空白,此时Fe2+终浓度为 0.10.05 0.0250.01250.006250.0031250.001560.00078μmol/mL

2、分光光度计预热30min以上,调节波长至593nm,蒸馏水调零。

3、操作表

试剂名称(μL

空白管(μL

测定管(μL

混合液

900

900

样本


30

双蒸水

120

90

充分混匀,反应10min,双蒸水调零,1cm光径,测定A593,计算△Aˊ=A测定-A空白管。(注:空白管只需测定一次)

 

三、总抗氧化能力计算

1、标准曲线绘制

Fe2+终浓度为横坐标,以△A为纵坐标绘制标准曲线,得到线性回归方程y=kx+b,将△Aˊ带入方程求得 x(μmol/mL)。

2、计算公式:

单位定义:样品的抗氧化能力以达到同样吸光度变化值(△A)所需的标准液离子浓度表示。

1)按蛋白浓度计算

总抗氧化能力(U/mg prot=x×V反总÷(V样×Cpr=34×x÷ Cpr

2)按样品质量计算

总抗氧化能力(U/g鲜重)=x×V反总÷(V样÷V样总×W=34×x÷ W

3)按细胞数量计算

总抗氧化能力(U/104cell= x×V反总÷(V样÷V样总×细胞数量)= 34×x÷细胞数量

4)按液体体积计算

总抗氧化能力(U/mL=x×V反总÷V=34×x

V样总:加入提取液体积,1mLV反总:反应总体积,1.02mLV样:反应中样品体积,0.03mLW:样品质量,gCpr:样本蛋白浓度,mg/mL;细胞数量:以104为单位,万个。

 

注意事项:

1.        试剂二对人体有刺激性,请采取适当的防护措施。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴乳胶手套操作。

2.        尽量避免使用在酸性条件下呈蓝色或接近蓝色的样本,否则对本试剂盒的检测结果产生干扰。

3.        样品中不宜添加TweenTritonNP-40等去垢剂和 DTT、巯基乙醇等影响氧化还原反应的还原剂。

4.        如果样品测定出来的吸光值在标准曲线范围以外,需把样品适当稀释或浓缩后再进行测定。

5.        试剂盒2-8℃保存。

 

 


留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
在线咨询
电话咨询
在线客服