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NaOH/SDS溶液 核酸类

简要描述:

NaOH/SDS溶液 核酸类由NaOH溶液和SDS溶液等组成,临用前等量混合使用,溶液呈碱性,是碱裂解法提DNA的重要成分。

更新时间:2021-09-24型号:厂商性质:生产厂家浏览量:39

NaOH/SDS溶液 核酸类


产品货号T11027

产品规格:2×100ml/2×500ml

产品简介:

 碱裂解法是常用的小量制备质粒DNA的方法,可用于抽提微克级别的质粒DNA。葡萄糖-Tris-EDTA溶液(GTE)、NaOH/SDS溶液和乙酸钾溶液(5mol/L,pH4.8)是其常用试剂。NaOH/SDS溶液由NaOH溶液和SDS溶液等组成,临用前等量混合使用,溶液呈碱性,是碱裂解法提DNA的重要成分。其原理是:当菌体在NaOH和SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,加入中和液(乙酸钾溶液)后,质粒DNA分子迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清中,由于蛋白质和染色体DNA不复性而呈絮状,离心时可沉淀下来。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。

产品组成:

     产品名称            2×100ml        2×500ml        保存条件    
试剂(A): NaOH溶液100ml500ml室温
试剂(B):SDS溶液100ml500ml室温


操作步骤(仅供参考)

1. 配置 NaOH/SDS 溶液:取 NaOH 溶液和 SDS 溶液等比例混合后使用,宜临用前配置。

2. 接种一个单菌落于 LB 培养基中,37℃培养至饱和状态。

3. 取 1.5ml 培养液,10000~12000g 离心 20~60s,弃上清。 

4. 用 100μl 葡萄糖-Tris-EDTA 溶液彻底重悬沉淀,室温静置 5min。 

5. 加入 200μl 新鲜配置的 NaOH/SDS 溶液,颠倒混匀数次,可在冰上放置 2~5min,使细胞膜破裂。 

6. 加入 150μl 乙酸钾溶液,将管温和颠倒数次混匀,见白色絮状沉淀,可在冰上放置 3~5min,此时,质量 DNA复性,染色体和蛋白质不可逆变性,形成不可溶复合物。 

7. 加入 150μl 酚氯仿异戊醇,震荡混匀,4℃12000r/min 离心 10min。继续后续实验。

注意事项:

1. NaOH 溶液呈强碱性,请小心操作,如果皮肤接触,应尽快擦干并用流水充分冲洗。 

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期12个月


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