产品中心您现在的位置:首页 > 产品展示 > 试剂盒 > 蛋白类 > 蛋白快速银染试剂盒

蛋白快速银染试剂盒

简要描述:

蛋白快速银染试剂盒(Protein Fast Silver Stain Kit)是一种快速的可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白银染染色的试剂盒,该试剂盒含有增敏步骤,可明显降低背景。

更新时间:2021-07-16型号:厂商性质:生产厂家浏览量:73

蛋白快速银染试剂盒 

产品货号:15138

 产品规格:20T 

产品简介:蛋白快速银染试剂盒(Protein Fast Silver Stain Kit)是一种快速的可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白银染染色的试剂盒,该试剂盒含有增敏步骤,可明显降低背景。其优点还在于:1、操作简单、快速;2、可用于2D凝胶的银染,并可进行后续的质朴检测;3、目的条带清晰;4、不含甲醇。Protein Fast Silver Stain Kit与Protein SilverStain Kit相比,前者操作速度更快,但检测灵敏度可能低于后者,尤其是在检测小分子量蛋白质的时候。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。 

产品组成:

                                      试剂名称                         20T                             保存条件 

试剂(A): Silver Stain Sensitizer(500×)                 2×1ml                             室温

 试剂(B): Silver Stain(100×)                                   10ml                          室温,避光 

试剂(C): Silver Stain Developer(5×)                    2×100ml                      室温,避光

 试剂(D): Silver Stain Stop Buffer(10×)                  100ml                           室温 

自备材料:

1. 水平摇床或侧摆摇床

 2. 去离子水(超纯)

 3. 乙醇、冰乙酸

 操作步骤 (仅供参考) :

1. 准备工作:以下操作以 8.5×5.5cm、厚度为 1.0mm 的凝胶为例,以凝胶全部浸没到溶液为准,一般用量是25ml,对于凝胶体积较大的,各溶液的使用量需按凝胶体积比例放大。整个银染过程应在摇床上进行,摇床转速控制在 60~70rpm。提前配制固定液,即按无水乙醇:冰乙酸:去离子水=5:1:4 的比例配制。提前配制洗涤液,即按无水乙醇:去离子水=1:4 的比例配制。

 2. 水洗:电泳结束后,取凝胶放入去离子水中清洗 2 次,每次 5min。

 3. 固定:取凝胶放入 50~100ml 固定液中,在摇床上室温摇动 15~20min,重复固定步骤 1 次。

 4. 洗脱:取凝胶放入洗涤液中清洗 2 次,每次 5min。

 5. 水洗:去离子水清洗凝胶 2 次,每次 5min。

 6. 增敏:配制银染增敏工作液,即取 Silver Stain Sensitizer(500×)0.1ml 加入到 50ml 去离子水中,混匀,即 1×Silver Stain Sensitizer,一般应 2h 内用完。室温下用 1×Silver Stain Sensitizer 孵育凝胶 2min,立即用去离子水清洗凝胶 2 次,每次 1min。 

7. 银染:配制银染工作液,即取 Silver Stain(100×)0.5ml 加入到 50ml 去离子水中,混匀,即得 1×Silver Stain,一般应 2h 内用完。取凝胶入 1×Silver Stain,在摇床上室温摇动 10~20min。 

8. 水洗:弃液,在摇床上用去离子水清洗凝胶 2 次,每次 30s,摇动速度在 60~70rpm。总的水洗时间应控制在 1.5min 内。

 9. 显影:配制银染显影工作液,即取 Silver Stain Developer(5×)10ml 加入到 40ml 去离子水中,混匀,即 1×Silver Stain Developer,一般应 30min 内用完。清洗凝胶后,立即置于 1×Silver Stain Developer 中,室温孵育 2~10min,直至蛋白条带清晰可见。一般显色 30s 后就会出现棕色沉淀,继续显影 2~3min,亦可延长至5min 以上,如果显影效果不佳,可重新更换 1×Silver Stain Developer 继续显影。

 10. 迅速用去离子水清洗凝胶以避免显影过度,背景染色。立即加入银染终止液,摇床上摇动 10min,以终止显色反应。(配制银染终止液,即取 Silver Stain Stop Buffer(10×)10ml 加入到 90ml 去离子水中,混匀,即 1×Silver Stain Stop Buffer,一般应 24h 内用完。) 

11. 保存:弃终止液,加入去离子水 50ml,摇床上摇动 2~5min,弃液。短期保存于新鲜去离子水,长期保存可以制备干胶。

 注意事项:

  1. 背景过深:①显色时间过长;②洗涤不充分;③凝胶中残留物质未去除干净;④去离子水的纯度过低。

2. 蛋白条带较浅:①蛋白的半胱氨酸含量过低;②银染后水洗时间过长;③蛋白量较低;④固定后的洗涤时间不够,导致乙酸残留。 

3. 凝胶上出现杂质或非蛋白的印迹:①凝胶没有被充分浸没,应加入足量溶液;②容器没有清洗干净;③凝胶接触金属物质;④指纹或其他压迹。

 4. 本染色液呈酸性,有轻微腐蚀性,使用时请作必要防护。5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。有效期:

6 个月有效。

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
在线咨询
电话咨询
在线客服