产品中心您现在的位置:首页 > 产品展示 > 试剂盒 > 蛋白定量试剂盒 > 紫外法蛋白定量试剂盒

紫外法蛋白定量试剂盒

简要描述:

尚宝生物紫外法蛋白定量试剂盒优点是:操作迅速、简便,不易受低浓度盐类的干扰;缺点是与标准蛋白中酪氨酸、色氨酸含量差异较大的蛋白质,准确性较差。样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸会干扰检测结果。

更新时间:2021-07-13型号:厂商性质:生产厂家浏览量:50

紫外法蛋白定量试剂盒

产品货号:15228

 

产品规格:250T/500T

 

产品简介:

蛋白质分子中存在含有共轭双键的酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸,使蛋白质在270290nm波长范围内具有收紫外光的性质,其中酪氨酸的最大吸收峰为275nm,色氨酸的最大吸收峰为280nm,苯丙氨酸的最大吸收峰为

257nm。在上述波长范围内,蛋白质溶液的吸收值与其浓度呈正比,可作定量测定。

尚宝生物紫外法蛋白定量试剂盒优点是:操作迅速、简便,不易受低浓度盐类的干扰;缺点是与标准蛋白中

酪氨酸、色氨酸含量差异较大的蛋白质,准确性较差。样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸会干扰检测结果。

 

产品组成:

名称

250T

500T

保存条件

试剂(A): 蛋白稀释液(10×)

50ml

100ml

室温

试剂(B): 蛋白标准(BSA)

2×20ml

3×20ml

-20

 

自备材料:

1. 分光光度计或酶标仪

2. 96孔板或离心管

 

操作步骤( 仅供参考)

1. 用去离子水或蒸馏水稀释蛋白稀释液(10×),即为蛋白稀释工作液。取120mg的蛋白标准,加入20ml蛋白稀释工作液,即配制成蛋白标准(1mg/ml)-20℃保存。

2. 标准曲线法:取若干试管或96孔板,如下操作以分光光度法为例。选用1cm的石英比色皿,在280nm处以第1管作为调零点,分别检测各管吸光度,以A280为纵坐标,以蛋白质浓度为横坐标,绘制标准曲线。

试管号

1

2

3

4

5

6

7

8

蛋白标准(1mg/ml)

0

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

3.0

4.0

蛋白稀释工作液(ml)

4.0

3.5

3.0

2.5

2.0

1.5

1.0

0

蛋白浓度(mg/ml)

0

0.125

0.250

0.375

0.500

0.625

0.750

1.000

1ml待测蛋白加至3ml的蛋白稀释工作液中,混匀,分光光度计或酶标仪测定A280

根据标准曲线计算出样品的蛋白浓度。

3. Lowry-Kalckar(又称280nm260nm吸收差法):对于含有核酸的蛋白质,无需制作标准曲线。以蛋白稀释工作液作为调零点,取1ml待测蛋白加至3ml的蛋白稀释工作液中,混匀,分光光度计或酶标仪测定A280A260。根据经验公式计算出待测样品的蛋白浓度,如果蛋白浓度过高应用蛋白稀释工作液稀释后再行检测。

蛋白质浓度(g/L)=1.45×A280 -0.74× A280

4. Waddell(又称215nm225nm吸收差法):对于蛋白质含量较少的溶液,适用于该法。取若干试管或96孔板,如下操作以分光光度法为例。以蛋白稀释工作液作为调零点,取1ml蛋白标准(1mg/ml)加至3ml的蛋白稀释工作液中,混匀,分光光度计或酶标仪测定A215A225。以215nm225nm吸光度值之差(D=A215-A225)为纵坐标,以蛋白浓度为横坐标,绘制标准曲线,再测出未知样品的吸收差,即可由标准曲线查出未知样品的蛋白质浓度。或者不用制作标准曲线,直接按照如下经验公式计算:

蛋白质浓度(g/L)=144×(A215-A225)

 

注意事项:

1. 蛋白标准(BSA)粉末溶解于蛋白稀释工作液,该液中含有防腐剂,不影响后续检测,该蛋白标准液-20℃保存。

2. 待测蛋白溶解于什么样的稀释液中,蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中,否者待测蛋白与蛋白标准中所含非蛋白成分不一致,有可能导致测定不准确。

3. 如果没有分光光度计,也可以使用酶标仪测定,但应考虑根据比色皿的最小检测体积。

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

有效期:12个月有效。蛋白标准配制成溶液后应-20℃冻存。

 

 

 


留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
在线咨询
电话咨询
在线客服