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杆粒提取试剂盒(核酸提取纯化相关)

简要描述:

杆粒提取试剂盒(核酸提取纯化相关)适用于大量从DH10Bac转化株提取重组杆粒pFastBac。纯化后的杆粒DNA使用PCR检验或者进行转染。

更新时间:2021-11-29型号:厂商性质:生产厂家浏览量:122

产品货号:10123

产品规格:100 次/200 次

产品简介:

杆粒提取试剂盒(核酸提取纯化相关)适用于大量从DH10Bac转化株提取重组杆粒pFastBac。纯化后的杆粒DNA使用PCR检验或者进行转染。

 

包装清单:

产品名称 100 次 200 次 储存条件
Solution 1 30ml 60ml 2-8℃
Solution2 30ml 60ml 室温
KAC 30ml 60ml 2-8℃
End Solution 4ml 8ml 2-8℃

自备试剂:50 次自备 36ml 无水乙醇/100 次自备 72ml 无水乙醇/100 次自备 144ml 无水乙醇。

 

操作步骤:

1. 将估计 DNA 反应液的体积,加入 5 倍体积的 Buffer PG,充分混匀(无需去除石蜡油或矿物油)。 注意:如 DNA 反应体系为 50µl(不包括石蜡油体积),则加入 250 µl Buffer PG。

2. 柱平衡:向已装入收集管(Collection Tubes)中的吸附柱(Spin Columns)中加入 200μl Buffer

3. PS,12000 rpm 离心 1 分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。

4. 将步骤 3 或 4 所得溶液加入到已装入收集管的吸附柱中,室温放置 2 分钟,12000 rpm 离心 1 分钟,倒掉收 集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。

5. 向吸附柱中加入 450 μl Buffer PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000 rpm 离心 1 分钟,倒掉收 集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。

注意:如果纯化的 DNA 用于盐敏感的实验(例如平末端连接或直接测序),建议加入 Buffer PW 静置 2-5 分钟再离心。

6. 重复步骤 4。

7. 12000 rpm 离心 1 分钟,倒掉收集管中的废液。

注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。 将吸附柱放到一个新的 1.5 ml 离心管(自备)中,向吸附膜中间位置悬空滴加 50μlBuffer EB,室温放置 2 分钟。 12000 rpm 离心 1 分钟,收集 DNA 溶液。-20℃保存 DNA。

注意事项:

1. 使用前应按照试剂瓶标签的说明在 Buffer PW 中加入无水乙醇。

2. 所有离心步骤均可室温下进行。

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