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苏木素伊红(HE)染色试剂盒

简要描述:

苏木素伊红(HE)染色试剂盒中,苏木素染色液采用 尚宝生物 自主研发的配方,由进口的高纯度苏木精、氧化剂等组成,不含甲醇等有害物质,对细胞核染色效果好。其特点是不易产生沉淀和金属; 应用范围广,可以用于人、动物、畜牧、水产等领域,可以用于组织石蜡切片、冰冻切片和组织细胞的染色等;苏木素染色液可以重复使用。

更新时间:2021-11-22型号:厂商性质:生产厂家浏览量:283

产品货号:S20202

产品规格:2×100ml

产品简介:

苏木素伊红(HE)染色试剂盒,简称 HE 染色,是病理学常规制片中基本的染色方法, 应用极其广泛。苏木精是从原产中南美的洋苏木中提取出来的浅黄褐色的结晶,是一种碱性染色剂,它在 被氧化后生成苏木素,同媒染剂(常用的是三价的铝或盐铁)一起使用,能够使细胞核染色。在病理诊断、教 学和科研工作中,常用 HE 染色对正常组织和病变组织进行形态结构观察。对于确定或鉴别病变组织、细 胞中出现的某些异常物质不特殊成分,而需要采用的特殊染色方法、酶组织化学方法、免疫组织化学方法 等也均是在观察HE 染色组织切片的基础上进行的。在 HE 染色的组织切片中,细胞核呈蓝色,细胞浆呈 红色,二者形成鲜明的对比,易于观察分析。

 

苏木素染色液采用 尚宝生物 自主研发的配方,由进口的高纯度苏木 精、氧化剂等组成,不含甲醇等有害物质,对细胞核染色效果好。其特点是不易产生沉淀和金属; 应 用范围广,可以用于人、动物、畜牧、水产等领域,可以用于组织石蜡切片、冰冻切片和组织细胞的染色 等;苏木素染色液可以重复使用。

 

染色原理:

1、细胞核染色的原理:

苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是 DNA,在 DNA双螺旋结构 中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使 DNA 双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易不带正电荷的苏木 素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。

2、细胞浆染色的原理:

伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两 性化合物,细胞浆的染色不染液的 pH 值密切相关。当染色液 pH 值在胞浆蛋白质等电点(4.7~5.0)以下时, 胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电 荷的阴离子,不胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。

3、分化作用:

染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为 分化液。在 HE 染色中常用 1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织不色素分离 而退色。大多数组织经苏木素染色后,必须用 1%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核不细胞浆染色的分明。

4、返蓝作用:

分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝 色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色,立即用水除去组织切片上的酸而中止分化,再用弱碱性 水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色,这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核 返蓝,但所需时间较长。

 

产品组成:

试剂名称 规格 保存条件
试剂(A): 苏木素染色液 100ml 室温,避光
试剂(B): 伊红染色液 100ml 室温,避光

 

自备材料:

1、盐酸乙醇分化液

2、蓝化液,如稀氨水、碳酸锂溶液等

3、系列乙醇

4、4%多聚甲醛

 

操作步骤:

(一)石蜡切片染色

1、切片脱蜡至水

①二甲苯作用 2 次,每次 5~10min。

②(可选)无水乙醇作用 2 次,每次 3~5min。

③95%的乙醇 3~5min

④90%的乙醇 3~5min

⑤80%的乙醇 3~5min

⑥自来水或蒸馏水 1~3min

2、染色

①苏木素染色液染色 5~8min

②自来水或蒸馏水冲洗 5~10s

③(可选)盐酸乙醇分化 2~5s

④自来水冲洗 20~30s

⑤蓝化液返蓝 20~40s

⑥自来水冲洗 30~60s

⑦伊红染色液染色 3~5min

⑧自来水冲洗 1~5s

2、脱水、透明、封固

①80%乙醇 10~20s

②90%乙醇 10~20s

③95%乙醇作用 2 次,每次 1~2min。

④无水乙醇作用 2 次,每次 2~3min。

⑤二甲苯透明 3 次,每次 2~3min。

⑥中性树脂封片。

染色结果:

细胞核呈蓝色;细胞质、肌纤维、胶原纤维、甲状腺胶质等呈深浅不一的红色;角蛋白、红细 胞等呈明亮的橙红色。

(二)冰冻切片染色

1、乙氧基乙烷混合固定液 5~10s

2、自来水冲洗 2~5s

3、苏木素染色液滴染 1~2min(可加热至 50℃)。

4、自来水冲洗 2~5s

5、(可选) 盐酸乙醇分化 2~5s

6、自来水冲洗 2~5s

7、蓝化液返蓝 2~5s

8、自来水冲洗 5~10s

9、伊红染色液染色 2~5s

10、自来水冲洗 1~2s

11、80%的乙醇 1~2s

12 、95%的乙醇 1~2s

13、无水乙醇 2~5s

14、苯酚二甲苯(1:3) 2~5s

15、二甲苯透明 3 次,每次 2~5s 16、中性树脂封片

 

备选方案:

1、无需脱蜡,直接迅速用蒸馏水冲洗 2~3min。

2、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤。

 

染色结果:

细胞核呈蓝色;细胞质、纤维呈红色。

 

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