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吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色试剂盒

简要描述:

吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色试剂盒:细胞死亡的检测可以通过荧光色素染色区分活细胞、死细胞,测定细胞代谢活性和形态学观察。这些方法都是利用细胞凋亡这种情况进行测定的,因而不一定反映实际情况。MTT法是测定线粒体中特有酶的活性,反映细胞数目的变化,其结果与细胞死亡的数目未必完全一致。

更新时间:2021-01-15型号:厂商性质:生产厂家浏览量:61

吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色试剂盒

产品货号:26330

产品规格:100T

产品简介:

  细胞凋亡(Apoptosis)的检测方法有形态学、生物化学、DNA的片段化检测方法以及TUNEL等标记片段化DNA 方法,但从细胞凋亡概念产生的历史及准确性方面考虑,使用显微镜进行的形态学观察也是很重要的。细胞死亡 的检测可以通过荧光色素染色区分活细胞、死细胞,测定细胞代谢活性和形态学观察。这些方法都是利用细胞凋 亡这种情况进行测定的,因而不一定反映实际情况。MTT法是测定线粒体中特有酶的活性,反映细胞数目的变化, 其结果与细胞死亡的数目未必完全一致。

 吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色试剂盒(Acridine Orange, AO)属于三环杂芳香燃料,可以标记DNA、RNA,属于异染性荧光染料,AO常用于 细胞内DNA和RNA进行检测。AO与核酸结合方式主要有:1、插入性结合,AO嵌入核酸双链的碱基对之间,这 种结合方式主要为AO与DNA的结合,其荧光发射峰为530nm,激发后呈绿色荧光;2、静电吸引,带正电荷的AO 与单链核酸的磷酸根(带负电荷)产生静电间的吸引结合,这种结合方式主要为AO与RNA的结合,其荧光发射峰为 640nm,激发后呈红色荧光,少量结合会呈桔黄色或桔红色荧光。因此,吖啶橙嵌合到双链DNA分子中显绿色, 与DNA单链或RNA结合时发橙红色荧光。

  溴化乙锭(Ethidium Bromide,EB)嵌合到双链DNA或RNA的碱基对中,无碱基特异性,发红色荧光。吖啶橙可 透过活细胞膜,EB不能通过与活细胞膜具有相同通透性的细胞膜。

产品内容:

产品名称 规格 保存温度 试剂(A):AO solution 200ul 4℃,避光 试剂(B):EB solution 200ul 室温 试剂(C):AO/EB Dilution Buffer 50ml 4℃,避光

自备材料:

1. 荧光显微镜

2. PBS

3. 细胞计数板

4. 载玻片、盖玻片

操作步骤(仅供参考):

1. AO/EB工作液的配制:取试剂(A)、试剂(B)、试剂(C),试剂(A):试剂(B):试剂(C)按照一 定的比例稀释成AO/EB工作液。

2. 每份细胞样品中加入AO/EB工作液,混合均匀。

3. 低速离心:离心,弃上清。

4. 用AO/EB Dilution Buffer重悬细胞,细胞计数,将细胞密度调整。

5. 细胞悬液中,加入AO/EB工作液,充分混匀。

6. 取洁净载玻片,滴加上细胞悬液,轻轻盖上盖玻片。

7. 在荧光显微镜B域进行观察。 染色结果: 活细胞 绿色荧光 死细胞 橙色荧光

注意事项:

1. 用能通过活细胞膜与DNA结合后发蓝色荧光的Hoechist 33342和只能通过死细胞与DNA结合后发红色荧光 的碘化吡啶( propidium iodide,PI)对细胞进行双染的方法也比较常用。

2. 如有低温离心机进行离心效果更佳。

3. 操作过程中应注意减少试剂(A)、试剂(B)暴露于强光下的时间。

4. EB solution有一定毒性,请小心操作。

5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期:

6个月有效。

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