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淋巴细胞培养基(染色体病)

简要描述:

淋巴细胞培养基(染色体病)为细胞标本前处理试剂,用于淋巴细胞增殖培养,培养后的淋巴细胞用于体外诊断,该产品不用于治疗性用途。

更新时间:2021-01-15型号:厂商性质:生产厂家浏览量:48

淋巴细胞培养基(染色体病)

产品名称:

通用名称:淋巴细胞培养基(染色体病)

英文名称:Lymphocyte Medium

包装规格:4ml/瓶,56 瓶/盒

预期用途:

淋巴细胞培养基为细胞标本前处理试剂,用于淋巴细胞增殖培养,培养后的淋巴细胞用于体外诊断,该产品不用于 治疗性用途。 主要组成成分: RPMI1640、小牛血清、肝素、PHA 等。

使用方法:

1. 采血与接种

  采取外周血 1-2ml,在无菌条件下立即种血 0.3ml(7 号针头约 20 滴)至淋巴细胞培养基内,充分摇匀。

2. 培养

  将培养瓶放入 37℃恒温箱中培养 68-72 小时,培养期间注意观察培养基有无凝血、溶血或长菌的现象 (可培养 24 小时后将培养基轻摇一次,以便细胞可以获得充分的营养)。

3. 制片

3.1 秋水仙素处理:

  在终止培养前,加入浓度为 20μg/ml 的秋水仙素 1-3 滴(7#针头竖滴)后,继续培养 2-3 小时;

3.2 收细胞:

  将培养完成的培养基倒入对应的离心管内,以 1500rpm 离心 7-10 分钟,弃去上清液;

3.3 低渗:

  向离心管内加入 37℃预温的低渗液(0.075mol/L 氯化/钾溶液)8ml,用吸管反复吹匀 10 次,置 37℃水浴箱 中水浴 25-35 分钟;

3.4 预固定:

  向低渗的细胞悬液内缓慢加入新配制的固定液(甲醇和乙酸按 3:1 的比例混合)1-1.5ml,轻轻混匀后置室温 静置 20 分钟后,1500rpm 离心 7-10 分钟,弃去上清液;

3.5 固定:

  沿管壁缓慢加入现配的预温至 37℃的新配固定液约 8ml 轻轻混匀,然后 2000rpm 离心 10 分钟。加入固定液 再次固定,弃上清,重复固定 1-2 次。用固定液将沉淀调成细胞悬液(不宜太浓,一般加固定液至 0.5ml)在冰 片上滴片,每张片上滴 2 滴。

3.6 烤片:

  立即放入 75℃烤箱中烤片 3 小时。

4. 显带

  先将玻片放在预温至 37℃的 0.25%胰酶溶液中(pH=7.2-7.4)消化 1 分左右,每次作用时间并不完全相同。 可先试一张片子,再根据显带效果调整胰酶作用时间,再放在预温至 37℃的 0.85% NACl 溶液中漂洗两次,在预 温至 37℃的吉姆萨染液中染色 10 分钟,自来水冲洗干净,用吹风机吹干,即可阅片。

注意事项:

1. 采集的外周血若立即接种则无需加肝素抗凝,如需保存标本,应加肝素抗凝;

2. 采集的外周血在冰箱 4℃保存,保存期不亦超过一周。

储存条件及有效期:

  4-8℃保存,有效期 1 个月,-5℃以下保存,有效期 12 个月,可稳定至保质期末。

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