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细胞核蛋白提取试剂盒

简要描述:

细胞核蛋白提取试剂盒能够简单、快速的提取来源于哺乳动物细胞的细胞核和细胞浆蛋白,所提取蛋白保持生物学活性。抽提获得的核蛋白及浆蛋白纯度高,有效避免核/浆蛋白的交叉污染,可以用于Western、Gel Shift、报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。

更新时间:2021-01-15型号:厂商性质:生产厂家浏览量:102

细胞核蛋白提取试剂盒 200 次

产品货号:26111

产品简介:

  细胞核蛋白提取试剂盒能够简单、快速的提取来源于哺乳动物细胞的细胞核和细胞浆蛋白,所提取蛋白保持生物学活性。抽提获得的核蛋白及浆蛋白纯度高,有效避免核/浆蛋白的交叉污染,可以用于Western、Gel Shift、报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。

产品内容:

 产品信息包装 储存条件 
 细胞核抽提试剂 A 100ml 4℃
 细胞核抽提试剂 B 100ml 4℃
 细胞核抽提试剂 C 7ml 室温

操作步骤:

1.请在蛋白抽提前取出抽提试剂 A、B 和 C 进行预冷

2.收集细胞,计数。离心去上清。

3.1×10 7细胞中加入 0.5ml 细胞核抽提试剂 A,涡旋 5 秒以充分混匀,冰上孵育 10 分钟。

注意:

  各种细胞的特性不同,需要根据不同细胞的特性调整细胞核抽提试剂 A 的用量,如果蛋白浓度 小,按比例减少细胞核抽提试剂 A 及后续细胞核抽提试剂 B、C 的用量。

4.4℃ 3000 rpm 离心 10min,吸弃上清。

5.加入 374μL 细胞核抽提试剂 B,再加入 26μL 细胞核抽提试剂 C

6.将步骤 5 中溶液加入玻璃匀浆管中,用玻璃匀浆管冰上反复匀浆 20 次,冰上孵育 30min。 7.4℃ 12,000 rpm 离心 20 分钟,收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中,-20℃ 8.保存(此提取液为胞核蛋白)。

注意事项:

1.如需提取磷酸化蛋白请在抽提试剂中加入磷酸酶抑制剂。

2.所有样品操作请置于冰上进行。

3.可以采用更高的速度来离心。

4.根据实验需求,细胞核抽提试剂 A& B 使用前加入合适的蛋白酶抑制剂。

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