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血液基因组提取试剂盒(高盐法)

简要描述:

血液基因组提取试剂盒(高盐法)采用高盐法提取血液中的基因组DNA,可大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有 机化合物。提取的基因组DNA的片段大,纯度高,质量稳定可靠。
使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

更新时间:2021-01-15型号:厂商性质:生产厂家浏览量:61

血液基因组提取试剂盒(高盐法)

产品货号:28102

产品规格:50 次/100 次/200 次

产品简介:

血液基因组提取试剂盒(高盐法)采用高盐法提取血液中的基因组 DNA,可大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有 机化合物。提 取的基因组 DNA 的片段大,纯度高,质量稳定可靠。 使用本试剂盒回收的 DNA 可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern 杂交等实验。

包装清单:

 产品名称 50次包装 100次包装 200次包装  储存条件 
Buffer A30ml 60ml  120ml  室温 
Buffer B  25ml  50ml   100ml  室温 
SDS Solution3ml 5ml 10ml 室温 
High Salt Buffer20ml 40ml 80ml 室温 
Washing Buffer10ml 20ml  40ml  室温 
Buffer EB5ml 10ml    20ml   室温 
Proteinase K溶液  0.3ml 0.5ml 1ml  -20℃

自备试剂:

使用前 Washing Buffer 试剂 50 次加入 40ml 无水乙醇/100 次加入 80ml 无水乙醇/200 次加入 160ml 无水乙醇

操作步骤:

以下步骤以提取 0.2ml 血液中基因组为例,具体实验可根据血液量等比例减少。

1. 于离心管中加入 0.2ml Buffer A 和 0.2ml 预冷的超纯水。上下颠倒 6-8 次,冰上孵育 2-3min;

2. 3500rpm 离心 15min,弃上清;

3. 于沉淀中加入 0.2ml 的 Buffer A 及 0.6ml 的超纯水,涡旋 30s,3500rpm 离心 15min,弃上清;

4. 重复步骤 2-3;

5. 于沉淀中加入 0.5ml Buffer B,50μl SDS Solution 溶液,剧烈涡旋 30-60s 至沉淀重悬,加入 5μLProteinase K 溶液;

6. 充分颠倒混匀,56℃放置 0.5-2h,其间颠倒混匀数次,溶液应变清亮(如溶液未彻底变清亮,请延长裂解时 间至溶液清亮为止)。 注意:加入缓冲液 Buffer B 时可能会产生白色沉淀,一般 37℃放置时会消失,不会影响后续实验。如溶液未变 清亮,说明细胞裂解不彻底,可能导致提取 DNA 量少和提取出的 DNA 不纯,需等比例补加 Buffer B 及 Proteinase K。

7. 将离心管冰上孵育 2-3min 至冷却,加入 High Salt Buffer0.4ml,剧烈涡旋 15s;

8. 12000rpm 离心 5min,将上清收集于一新的离心管中,加入等体积预冷的异丙醇,上下颠倒 5-6 次以沉淀析 出 DNA;

9. 12000rpm 离心 10min,吸弃上清,加入 1ml Washing Buffer ,轻轻吹起沉淀后 12000rpm 离心 10min,吸弃 上清。

10. 将离心管室温干燥,加入 20-50μl Buffer EB 重新溶解沉淀 DNA。-20℃保存 DNA。

注意事项:

1. *使用前应按照试剂瓶标签的说明在 Buffer PW 中加入无水乙醇。

2. 若 Buffer B 中有沉淀,可在 37℃水浴中重新溶解,摇匀后使用。

3. 所有离心步骤均可室温下进行。

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