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组蛋白提取试剂盒

简要描述:

本组蛋白提取试剂盒是由一套完整的优化buffer和试剂组成,用于从哺乳动物细胞或组织中提取总组蛋白(H2A、H2B、H3和H4),整个流程可在80min内完成,且可保持组蛋白提取物中的翻译后修饰(PTM)完整性,因此提取物可用于各种翻译后修饰检测及应用,包括组蛋白甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化、SUMO化和ADP-核糖基化作用研究。

更新时间:2021-07-26型号:厂商性质:生产厂家浏览量:77

产品简介:

组蛋白提取试剂盒是由一套完整的优化 buffer 和试剂组成,用于从哺乳动物细胞或组织中提取总组蛋 白(H2A、H2B、H3 和 H4),整个流程可在 80min 内完成,且可保持组蛋白提取物中的翻译后修饰(PTM) 完整性,因此提取物可用于各种翻译后修饰检测及应用,包括组蛋白甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化、 SUMO 化和 ADP-核糖基化作用研究。

 

包装清单:

产品名称 50 次 100 次 储存条件
Lysis Buffer 1 50ml 100ml 室温
Lysis Buffer 2 10ml 20ml 室温
Balance Buffer 2ml 4ml 室温
Adjust Buffer 200μl 300μl -20℃

 

组蛋白提取试剂盒产品特点:

1.所提取组蛋白可保留所有相关翻译后修饰,包括甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化、SUMO 化、 ADP-核糖基化以及 Neddylation 等。

2.建议每次从 10 8个细胞/0.1g 组织中提取组蛋白样品。

3.整个实验流程约需 80min。

4.无需超速离心。

 

操作步骤:

A:组织中提取

1.收集 0.1g 组织,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及适量蛋白酶抑制剂(依据实验选择),冰上用组织研磨器或匀 浆管研磨。

2.将匀浆后样品转移至 1.5ml 离心管中,11000rpm 5min,吸弃上清保留沉淀。

3.至步骤 2。

B:细胞中提取

1.收集约 10 8个细胞,3000rpm 5min(悬浮细胞直接离心,贴壁细胞使用细胞刮刀或胰蛋白酶消化离心收集 均可。注意用预冷 PBS 清洗残留培养基和胰蛋白酶等),吸弃上清。

2.至步骤 1。

步骤 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及适量蛋白酶抑制剂(依据实验选择),冰上孵育 30min(每 10min 用移液枪 吹打一次),4°C 11000rpm 离心 5min,弃上清。

步骤 2:于上述步骤离心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 涡旋一次),4°C 11000rpm 离心 5min,吸取上清于一新离心管中。

步骤 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步骤离心管中,用移液枪轻轻吹匀。

步骤 4:使用 BCA 定量试剂盒定量。

步骤 5:于步骤 3 离心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,轻轻吹匀,并应用于下游研究。

 

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