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5×蛋白上样缓冲液(含巯基还原剂)的说明书

发布时间:2022-05-13   点击次数:104次

蛋白上样缓冲液(含巯基还原剂)

产品货号T15258

产品规格:10ml

产品简介:

本产品适用于SDS-PAGE(SDS 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS,巯基还原剂,溴酚蓝,缓冲盐溶液等。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异,SDS还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构,β-巯基乙醇可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质的四级结构,消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。

 

操作步骤(仅供参考) 

1. 请按每40μL蛋白样品加入10μL上样缓冲液的比例(5倍稀释)来使用。如果蛋白浓度过高,可用双蒸水稀释。

2. 混匀后,100℃水浴加热3-5分钟,使蛋白变性。

3. 冷却到室温后,10000-14000rpm离心2-5分钟,取上清直接上样电泳即可。

  

注意事项: 

1. 聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右,胶浓度12%时,约在20kd 左右,胶浓度15%时,大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。

2. 本试剂因含巯基还原剂,有一定的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。  

 

保存条件:2-8℃保存,自发货之日起至少3个月有效。

 

 

 

 

 


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