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5×蛋白上样缓冲液(含DTT) 说明书

发布时间:2021-07-29   点击次数:484次

蛋白上样缓冲液(含DTT

产品货号T15257

产品规格:10ml

产品简介:

本产品适用于SDS-PAGE(SDS-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDSDTT,溴

酚蓝,缓冲盐溶液等。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完

全被SDS掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异;SDS还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的

二级和三级结构。DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质结构,消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。

 

操作步骤(仅供参考) 

1. 请按每40μL蛋白样品加入10μL上样缓冲液的比例(5倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高,可用双蒸水稀释。

2. 混匀后,100℃水浴加热5-10分钟,使蛋白变性。

3. 冷却至室温后,10000-14000rpm离心2-5分钟,取上清直接上样电泳即可。

  

注意事项: 

1. 聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右,胶浓度为12%时,约在20kd左右,胶浓度为15%时,大概在10kd。请根据自己目的条带来判断电泳时间。

2. 本试剂因含DTT,有一定的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

3. 蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂,PH 值受保存温度影响,在低温冻存状态下,溶液可能会呈现深棕色,不影响产品使用。  

 

保存条件:-20℃保存,建议分装冻存,避免反复冻融,自发货之日起至少12个月有效。 


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